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PIPES(哌嗪N,N`二(2 乙磺酸))是一種兩性緩沖液,緩沖PH范圍在 7.2 - 7.4,,不溶于水,,但可溶于氫氧化鈉水溶液。 PIPES包含在Good’s緩沖液中,,廣泛應(yīng)用于疫苗生產(chǎn),,組織培養(yǎng)、陽離子功效的研究,、以及生物物質(zhì)的分離技術(shù)等方面,。
PIPES緩沖劑的基本介紹
PIPES與其它緩沖劑不同,例如:BIS-TRIS,、BICINE,,它和很多金屬離子無法形成穩(wěn)定的化合物,,所以非常適用于作為金屬離子溶液中的緩沖劑。
PIPES的pKa值有兩個,,分別為1pKa和2.67pKa,,1pKa在環(huán)境溫度處于25°C下為6.76,接近生理pH,,緩沖范圍在6.1-7.5,,這就適用于細(xì)胞培養(yǎng)工作,2.67pKa在25°C下,,緩沖范圍為1.5-3.5,。
PIPES可以應(yīng)用在哪里
PIPES可應(yīng)用于磷酸纖維素色譜純化微管蛋白以及凝膠過濾法純化重組GTP,結(jié)合蛋白ARF1和ARF2,,作為緩沖液從大腸桿菌中結(jié)晶轉(zhuǎn)酮酶,。不過值得注意的是,由于PIPES可以形成自由基,,并不適用于氧化還原體系,。
PIPES緩沖劑的優(yōu)勢
1、動植物組織樣品的戊二醛固定可導(dǎo)致脂質(zhì)損失,,有明顯的形態(tài)變化,,當(dāng)使用PIPES緩沖戊二醛固定劑時,脂質(zhì)損失和偽影**小化,。
2,、如果固定在伴草酸鹽緩沖的戊二醛中進(jìn)行超細(xì)胞化學(xué)固定時,有可能會選擇性地喪失了堿性磷酸酶的活性,。當(dāng)使用PIPES作為緩沖液時,,活性保留率會有明顯提高。
3,、戊二醛和甲醛在PIPES緩沖液中結(jié)合,,熒光顯微鏡和電子顯微鏡的真菌游動孢子的固定能達(dá)到極佳。
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