產(chǎn)品信息

名稱Hs 578T(人乳腺癌細(xì)胞)(STR鑒定正確)

別稱HS 578T;Hs-578T;HS-578T;Hs_578t;Hs-578-T;HS-578-T;Hs 578.T;HS578T;Hs578T;Hs578t;HS0578T;578T;HS578;Hs578;Homo sapiens No.578,tumor cells

種屬人

年齡（性別）女,；74歲

組織來源乳腺癌

生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述Hs 578T細(xì)胞源自乳房癌，它與正常成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞株Hs 578Bst起源于同一位患者,。Hs 578T細(xì)胞**初是多角形的,，但在傳代過程中選擇并克隆了星形的細(xì)胞形態(tài),。電鏡下觀察發(fā)現(xiàn),，Hs 578T細(xì)胞內(nèi)酪蛋白顆粒聚集,、橋粒緊密連接、脂質(zhì)體和光滑內(nèi)質(zhì)網(wǎng)小泡,。Hs 578T細(xì)胞與Hs 578Bst細(xì)胞一樣,，未檢測(cè)到雌激素受體和內(nèi)生病毒。

生物安全等級(jí)1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基DMEM＋0.01mg/ml Insulin＋10%FBS＋1%P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時(shí)間~36-54 hours

凍存條件凍存液：55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮

培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5%溫度：37℃

致瘤性No,in immunosuppressed mice.Yes,in semisolid medium.

保藏機(jī)構(gòu)ATCC;CRL-7849 ATCC;HTB-126 BCRC;60120 DSMZ;ACC-781 ECACC;86082104

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基,；北美胎牛血清，10%,；添加0.01mg/ml牛胰島素,；雙抗，1%,。

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。**天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1.棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。