四極桿-靜電場(chǎng)軌道阱-線性離子阱三合一組合式質(zhì)譜,。包含三個(gè)質(zhì)量分析器,四極桿,、Orbitrap和線性離子阱(LIT),,具有超高分辨、高靈敏度,、多級(jí)質(zhì)譜能力,,并且配備多種裂解模式(CID、HCD及可升級(jí)的ETD),,非常適合蛋白質(zhì)組學(xué)中復(fù)雜體系的高通量蛋白檢測(cè),。
基本結(jié)構(gòu)包括離子源、離子光學(xué)器件,、質(zhì)量分析儀和檢測(cè)器,。
離子源
連接到LC的離子源是大氣壓電離(API)。API源用作LC和MS之間的接口,,包括以下電離技術(shù):加熱電噴霧電離(H-ESI),,大氣壓化學(xué)電離(APCI)和大氣壓光電離(APPI)。除了API離子源外,,在電動(dòng)離子漏斗后面的API離子源界面中還有**個(gè)離子源(RIS),。
離子光學(xué)器件
離子光學(xué)器件將氣相樣品離子聚焦并加速進(jìn)入質(zhì)量分析儀。它包括MP00離子光學(xué)器件,、MP0離子光學(xué)器件,、MP1離子光學(xué)器件、彎曲線性阱(C型阱),、離子路由多極(IRM),、MP3離子光學(xué)器件和DC偏移電壓。MP00離子光學(xué)器件包括MP00 RF透鏡和L0透鏡,位于API源接口和MP0離子光學(xué)器件之間,。MP0離子光學(xué)系統(tǒng),,也稱為有源束波導(dǎo)(ABG),將來(lái)自MP00離子光學(xué)系統(tǒng)的離子沿中心軸通過(guò)90度弧線傳輸?shù)剿臉O,。90度電弧可通過(guò)防止中性物質(zhì)和高速團(tuán)簇進(jìn)入四極桿來(lái)降低噪音,。MP1離子光學(xué)器件充當(dāng)離子傳輸設(shè)備,通過(guò)MS向棒施加射頻(RF)電壓以產(chǎn)生電場(chǎng),,沿著四極桿的軸引導(dǎo)離子,,從而將離子從四極桿傳輸?shù)紺阱。進(jìn)入C阱后,,離子通過(guò)與氮?dú)馀鲎矚怏w碰撞而失去其動(dòng)能,,并聚集在C阱的中心軸上。IRM包含一個(gè)安裝在金屬管內(nèi)的多極直管,,直接對(duì)準(zhǔn)C阱,。將電勢(shì)梯度施加到多極管以快速提取離子。MP3離子光學(xué)器件可以通過(guò)將射頻電壓施加到桿上的方式把離子從IRM傳輸?shù)诫p壓LIT,,以產(chǎn)生沿多極軸引導(dǎo)離子的電場(chǎng),。
質(zhì)量分析儀
Thermo Orbitrap Fusion三合一高分辨質(zhì)譜儀包含三個(gè)質(zhì)量分析儀,四極桿,、Orbitrap和LIT,。
四極質(zhì)量分析儀(Q1)包含四個(gè)圓桿。MS向桿施加RF電壓和DC偏移電壓,。當(dāng)將可變幅度的RF和DC電壓施加到可以產(chǎn)生電場(chǎng)的四極桿時(shí),,電場(chǎng)可以使具有特定m/z的離子產(chǎn)生穩(wěn)定的振蕩,而對(duì)所有其他離子產(chǎn)生不穩(wěn)定的振蕩,。即,,Q1用作質(zhì)量過(guò)濾器,使選定的離子能夠通過(guò)桿,。四極桿僅在施加RF電壓時(shí)用作離子傳輸設(shè)備
軸對(duì)稱的Orbitrap質(zhì)量分析儀包含一個(gè)紡錘狀的中心電極,,該中心電極被一對(duì)鐘形的外部電極圍繞。運(yùn)動(dòng)的離子可能被靜電場(chǎng)捕獲,。離子在Orbitrap內(nèi)部經(jīng)過(guò)靜電場(chǎng),,迫使它們以復(fù)雜的螺旋形運(yùn)動(dòng),。這些振蕩的軸向分量可以通過(guò)電極的兩半檢測(cè)為鏡像電流,。使用傅里葉變換將圖像電流轉(zhuǎn)換為質(zhì)譜圖。
LIT質(zhì)量分析器是雙單元二維LIT質(zhì)量分析器,,由前轉(zhuǎn)移透鏡(TL1),、高壓LIT池、中心轉(zhuǎn)移透鏡(TL2)、低壓LIT池和后轉(zhuǎn)移鏡頭(TL3)組成,。質(zhì)量分析器單元內(nèi)部是精密加工和**對(duì)齊的雙曲線桿的方形陣列,,該桿具有前、中,、后三個(gè)部分,。
LIT質(zhì)量分析儀進(jìn)行的步驟包括離子存儲(chǔ)、離子隔離,、碰撞誘導(dǎo)解離(CID)和離子掃描,。對(duì)于SIM或MSn,LIT質(zhì)量分析儀將離子隔離波形電壓施加到X桿上,,同時(shí)主AC電壓斜率上升到新的存儲(chǔ)電壓,,噴射出除選定m/z離子以外的所有離子。另外,,對(duì)于MSn,,LIT質(zhì)量分析器將共振激發(fā)AC電壓施加到X桿上,以產(chǎn)生CID,。為了掃描出離子,,主RF電壓從低壓上升到高壓,同時(shí)MS向X桿施加共振噴射AC電壓以促進(jìn)噴射,。隨著主RF電壓的增加,,m/z值增加的離子變得不穩(wěn)定,并通過(guò)X桿中的槽噴出,。
離子檢測(cè)系統(tǒng)
Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhì)譜儀具有高靈敏度和離軸離子檢測(cè)系統(tǒng),。該檢測(cè)系統(tǒng)包含兩個(gè)轉(zhuǎn)換打拿極和一個(gè)電子倍增器。它可產(chǎn)生高信噪比(S/N),,與檢測(cè)到的離子數(shù)量成正比,,并且可以在正負(fù)離子工作模式之間切換電壓極性。