ELISA檢測試劑盒-大鼠,小鼠等ELISA檢測試劑盒
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ELISA檢測試劑盒-大鼠,小鼠等ELISA檢測試劑盒
在世界范圍內用于治療多種廣泛的癌癥。它們以各自的商標名作為藥品銷售:Avastin®,,Erbitux®和Herceptin®。這項研究的目的是開發(fā)內部特異性酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA),,以評估這三種單克隆抗體的長期穩(wěn)定性。這些測定法通過量化單克隆抗體的生物學活性來評估其生物學功能,。為此,,我們開發(fā)了一種間接ELISA程序,將針對mAb的特異性抗原用作ELISA板上的特異性“捕獲”抗體,。因此,,我們在BVZ的ELISA中使用了血管內皮生長因子(VEGF); CTX ELISA中的人類表皮生長因子受體(hEGFR)和TTZ ELISA中的人類受體HER2(hHER2),。在單克隆抗體附著其抗原后,,我們使用抗人IgG(整個分子)過氧化物酶結合物和鄰苯二胺二鹽酸鹽底物。用硫酸終止反應,,并在450nm的波長處記錄吸光度,。三種ELISA方法在校準模型,測定范圍,,檢測和定量限,,日內和日間精度和準確性以及交叉反應的特異性方面得到了驗證。還對藥物進行了強制降解研究,,提供了有用的信息,。**終,擬議的ELISA成功地用于長期穩(wěn)定性研究中,,以量化已打開并隨后在兩種不同的存儲條件下(即在4°C下冷藏并在-20°C下冷凍)的藥物的剩余生物活性,。結果表明,,就其生物學功能而言,BVZ(Avastin®)是這三種中**穩(wěn)定的,。
Tau病理學與阿爾茨海默氏?。ˋD)進展之間的密切相關性使該蛋白成為診斷和監(jiān)測疾病進展的合適生物標志物。但是,,由于目前需要收集腦脊液(CSF),,這是一種侵入性臨床程序,因此Tau在診斷中的使用受到了阻礙,。盡管測量血漿中的Tau水平會比較有利,但其濃度常規(guī)ELISA的檢測極限,。在這項工作中,,我們開發(fā)了一種數字ELISA,用于定量緩沖液和生物樣品中阿托莫拉蛋白Tau的濃度,。*先使用內部開發(fā)的抗體將單個Tau分子捕獲在磁性粒子的表面,,然后分離到2×2×mm2微孔陣列的飛升大小的孔中。高親和力抗體,,**測定條件和數字量化方法的結合導致緩沖液樣品的檢測限(LOD)為24±±7 aM,。此外,通過將數字讀數與模擬方法相結合,,可以實現(xiàn)6個數量級的動態(tài)范圍,,從而可以使用同一平臺對Tau的摩爾濃度至皮摩爾濃度進行定量。這證明了本發(fā)明的測定方法與不同生物樣品中遇到的各種Tau濃度的兼容性,。接下來,,將開發(fā)的數字化驗用于檢測加標血漿中的總Tau水平。與緩沖液樣品相比,,獲得了相似的LOD(55±±29 aM),,其靈敏度是市售ELISA的5000倍,甚至比以前報道的數字化檢測的靈敏度提高了10倍,。**,,通過定量三個臨床CSF樣品中的蛋白質Tau來評估開發(fā)的數字ELISA的性能。在此,,在測量的活性顆粒百分比與參考蛋白Tau值之間發(fā)現(xiàn)高度相關性(即,,皮爾森系數為0.99)。提出的數字ELISA技術具有很大的潛力,,可以挖掘Tau作為早期AD診斷的生物標志物的潛力,。